薬剤試験実施時の定性分析

ポジティブな検査結果のためのプロスポーツにおける禁断の物質の大部分については、尿サンプルでの存在の確認を受けるのはむしろ簡単です。 スクリーニングの多くの方法が質量分析と組み合わせたクロマトグラフィーの応用に基づいているので、GH-MSおよびZhH-MSのシステムによる化合物の同定のための推奨が開発されている（/ MS）。 ある種の特徴的なイオンの相対的表示（質量分析法の適用される種類に依存する）において、類似の分析を受けた対応する標準試料との公差を考慮して、試料が匹敵することが確認されたと考えられる。 加えて、アスリートの尿試料の分析および要求物質を含む尿の対照試料の物質の控除の時間は、（逸脱の許される間隔内で）変化してはならない。 従って、尿検査のように、分析には困難な試料中の物質の特性および同定のために、研究された化合物の血漿および特に質量および分光計パラメータに関する定義値情報がある。 これまでに、刺激薬やマスキング薬の質量分析計特性の研究が数多く行われており、薬物検査を行う目的での検出方法も開発されている（Masse et al。、1989; de Boer et al。、1991 ; Donackeら、1995; Ayotteら、1996; Shackletonら、1997; Bowers、1998; Aguileraら、1999; Thevisら、2000年、2001年、2002年、2003a）。

さらに、これらの物質のいくつかの分析を実施する一般的な原則について検討します。

アナボリックステロイド

実施されたドーピング試験の結果および禁止された禁止物質のクラスに関する統計データを考慮すると、スポーツ同化ステロイドのドープが最も頻繁に適用されることに気付くことが可能である。 例えば、IOCが2001年に認定した研究室で発見された禁止物質の40％以上が同化ステロイドであった。 このグループの代表者の1人はメチルテストステロン誘導体テストステロンであり、残りのS-17の水素の金属基で置換されています。 同化ステロイドは大部分が代謝過程に積極的に関与し、その結果一連の代謝産物、例えばケト基の回収、ヒドロキシル基の酸化、ヒドロキシル化、ステロイド分子カーネルにおける通信炭素 - 炭素の酸化/回収（Schanzer、1996）。 この第I相の代謝の後、そして尿の一部としての配分の前に、代謝フェーズII、すなわち第I相の生成物のグリクロープチダまたは硫酸塩への結合が存在する。

アナボリックステロイドの代謝産物の同定の一般的に受け入れられている戦略は、第I相代謝物、その洗浄、濃縮、誘導体化およびその後のGH-MSの分析が形成される第II相の代謝産物の酵素加水分解に基づく。 アナボリックステロイドの代謝産物の大半は、以下の質問であろうナンドロンを除いて、天然の方法で人体に形成することができないため、これらの結合が尿中に検出された場合薬物検査では、陽性検査結果に関するメッセージが作成されます。

設計されたステロイド

2003年10月に、スポーツと科学の世界でいわゆる設計ステロイド（デザイナーステロイド）を使用する問題が発生しました（Knight、2003）。カリフォルニア大学ロサンゼルス校の薬物検査室が見つかりましたジェストリノンの物質誘導体は、子宮内膜症の治療に使用される医薬品である。 この結合の17番目の炭水化物に位置するエチニル体の残りは、トレンボロンの非常に有効な同化ステロイドの類似体とみなすことができるテトラグリゴストリノン（THG）のステロイドホルモンの形成を導くが、THGの生理学的影響および副作用の臨床試験は決して実施した。 臨床試験に合格した医薬品の検出で依然として参照されていた研究室での薬物検査の標準戦略は、勝利がライバルの不正になり、同時に危険を冒すようになった競技者の抱負を克服するには不十分である。 セットイオンのモニタリング（選択されたイオンモニタリング、SIM）または複数の反応のモニタリング（多重反応モニタリング）のような質量分析法のこのような技術の使用による尿検体との標準サンプルの比較に基づくスクリーニングの多くの手順を考慮するとMRM）、THGのような未知の派生物または医薬製剤は、標準的な制御手順のためには不可視であり、同様の構造を有する既知の物質および未知の物質の両方を検出するより柔軟な制御技術の開発を必要とし、例えば、原理的にはGH-MS / MS最近のシステムを利用して、特に、可能であること。あなたも気に入ることができ、一般的なステロイドコアTestalamin 。

内因性ステロイド

アナボリックステロイドを尿に適用する場合、正常に観察されない代謝産物が存在する場合、テストステロンをドープとして使用すると、このホルモンは人体内で産生されるため、はるかに困難である。 テストステロン/エピステステロン（T / E）および炭素の安定同位体比（IRMS）のいわゆる質量および分光計測定比の決定が最も広範囲に及ぶ様々なアプローチが、この目的のために開発された。 内因性ステロイドのプロファイルは様々な状況で変化する可能性があるが（Geyer et al。、1996）、比率η/εは、エピステステップの生成物がテストステロンとは無関係に生じるのでドープとしてのテストステロン使用の信頼できる指標であることが示された。 閾値としては、比率Т/Эの値が6に等しいが、閾値を超えた場合には、正の試験結果が直接的に記録されないので、自然に育ったテストステロンレベルの制御に関するさらなる研究に合格する。

質量分析法（IRMS）による同位体分析の利用可能性の増加は、このアプローチによって内因性テストステロンと合成テストステロンの区別の可能性を示した多くの研究を促進した。 特に、天然のテストステロンは、炭素同位体、3C / 2Cの比に基づいて医療用品として使用される化学的方法で合成された類似体とは異なることが確立された。 分析された物質のその後の燃焼および同時に形成された二酸化炭素の分析と共にGHを適用することにより、同位体比に基づくテストステロン起源についての情報を得ることができる（約3CおよびJC）（Homingら、1998 ; Aguilera et al。、1999）。

利尿剤およびβ2-アゴニスト

また、利尿薬やβ2-агонистыは、通常GH-MS（/ MS）を用いて分析する物質に属します。 特に、利尿薬の群は、類似または同一の目的のために指定された薬の化学的多様性を特徴とする。 酸性に起因する陰イオン化（Thieme et al。、2001; Thevis et al。、2002,2003a）を中心としたこのグループの物質の代表者に適用するが、いくつかの利尿薬、特にトリアムテレンでは陽イオン化が必要である。 β2-型については、主要なアプローチは、積極的に負荷された分子のその後の検出を伴う分析された物質である。 「分析法」に記載されているように、MSへのGHのイオン源は、通常、顕著な断片化なしにプロトン化または脱プロトン化された分子を生成することを可能にする。 したがって、分析物質の構造情報、質量分析器の特異性および選択性は、衝突によって誘発されたイオン化された薬物の解離（CAD）およびその後の派生断片の分析を利用して提供される。 この目的のために、電子ブロー（EI）からの分子の断片化のメカニズムが大きく異なるCADによって、分析分子の有効な活性化後のプロトンに対する親和性および解離生成物の挙動に関するデータを有することが必要である。 利尿薬、またバルクのβ2-агонистовについては、サルブタモールを除いて高品質の分析を行うだけで十分です。 通常、抽出されたイオンのホログラフィックグラムは、生物学的試験におけるこれらの物質のかなり感度の高い検出を可能にし、それらの入手可能性についての肯定的結論は、結果として生じるイオンの必須数値流行の基礎に基づいている。 2001年にIOCが認可した薬物検査の25の実験室で実施された陽性結果の約17.5％がβ2アゴニスト適用に属し、5％の症例で利尿薬が検出された。

薬物テスト：定量分析

エフェドリンなどの刺激物質を含むいくつかの物質では、サンドブタモールのようなナンドロロンおよびβ2-アゴニストなどの同化性ステロイドの代謝産物が、陽性または陰性の試験結果についての結論との比較に基づいて閾値レベルが確立される。 さまざまな理由がそのような決定の基礎となった。 エフェドリンは多くの鎮咳薬の一部であるため、アンチドーピング規則により、尿中のノルエフェドリン、エフェドリンおよびプソイドエフェドリンの含有量がそれぞれ5,10または25mg-mlを超えなければ、その適用は合法である。 サルブタモールは、シム・オブ・シム（simpatomimetik）の群を扱い、吸入の形態での適用の状態で、β2-агонистов（サルメテロール、テルブタリンおよびフォルモテロリと一緒に）の使用が許可されている4の1つである。 関連する連合体の試験でのサルブタモールの存在についての競技報告中に、どのように薬がどのように適用されるか（錠剤の形態またはエアロゾルの形態の口腔内）およびどんな用量で、むしろ困難であるかを決定するために、 物質の含有量が100ng-ml'1を超える場合。 競技間の期間中、治療的同化作用を有意に超える用量においていくつかの類似の類似体を使用する場合のような1mg-ml -1の閾値レベルが確立される.nandrolon5a-エストラジ-Za-ol-17-オジンの代謝産物の存在（ノルアンドステロナ）は、内因性の製品によってある程度まで発生する可能性があるため、この物質の閾値含有量は、男性では2μg* 1、女性では5ng-mlである。この代謝産物の内生的形成のレベル、例えば尿中の本物質の含有量を本質的に増加させるかなりの生理的ストレスまたは妊娠に影響を及ぼすことができる種々の要因も考慮した。類似または同一の物理的および化学的特性を有する対応する内部標準の標準的方法による決定の結果に基づいて構築された較正曲線の使用（Schanzer、Donike、1995）。

結論

薬物テストを実施する場合、低分子結合の分析は、血液および尿などの生物学的液体の試験における禁止薬物およびそれらの代謝産物の検出および同定を可能にする、血球分離および質量分析法の応用に主に基づいている。 これまでの分析では、主に、分割製品の検出を伴うガスクロマトグラフィー、例えば、熱心なイオン化および窒素リン検出器、ならびに質量分析計および分光計分析器などの様々な分析器によって実施された。 最新の研究では、大気圧下でのイオン化後の分離生成物が質量分析計に曝露される液体クロマトグラフィーが一般的であり、この方法は試料の調製時間を大幅に短縮することができ、分析物質の誘導体化を必要としない。 加えて、分析装置とイオントラップの3倍の応用により、既知の医薬品の決定と特性に関するより柔軟な質量分析計実験の実施と、未知の設計物質が可能になり、ドープとの不法使用に対する強化の強化も促進された禁止薬物。 禁忌物質のリストと刺激方法のリストから、薬物検査を行う際の注意が払われる物質の範囲は変わりなくなり、この動的プロセス内の検査室は絶えず分析方法を拡張し、スポーツにおける医薬品の乱用を制限するための新たな課題の解決策への感度、特異性、適応能力を向上させ、また、誤った疑惑からアスリートを救うためです。 そして、高速で高効率のクロマトグラフィー、質量分析計、高分解能と高感度の分野における新たな開発、そしてイオン化の現代的受容も分析ラボに、適用されたアプリケーションについてさらに詳細な情報を得る貴重なツールを提供します例えばその構造および代謝についての情報を提供し、刺激性薬物の乱用の識別の時間枠を拡大する。 競技の間にアナボリックステロイドなどの多くの医薬品が適用されているが、同時に刺激効果を数週間維持すると、本格的な薬物検査では、競技会中と競